第四节 酶类检测

  2．协助慢性肝病的鉴别：慢性肝炎活动期ASTm高于非活动期，肝硬化失代偿期高于代偿期。

    3．协助鉴别恶性胆管梗阻与胆囊炎、胆石症：胆囊炎、胆石症患者ASTm多为正常，而大多数恶性胆管梗阻患者血清ASTm增高。

    4．判定心肌梗死的严重程度及预后。

    同AST测定。

    a-羟丁酸脱氢酶(hydroxybutyrate dehydrogenase，α-HBD)

    连续监测法(37℃)：60~180U/L

    1．主要用于心肌坏死和肝功能障碍评价。α-HBD为LDH异构酶，用α-酮丁酸为底物测定的LDH活性，以LD1和LD2与α-酮丁酸的亲和力最强，分别为92%和78%，故可视为LD1和LD2的同工酶。其他LDH同工酶与a-酮丁酸也有一定的亲和力，如LD3为55%、LD4为39%、LD5为25%。

    2．AMI时，α-HBD与LDH同期升高，α-HBD/LDH>-0.8或>1，增高1~10倍以上并与LDH演变相一致或稍早。肝病时也可见升高，但α-HBD/LDH比值<0.6。

    3．α-HBD和LDH同时升高可见于甲状腺功能减退症及其他原因引起的LDH显著增高时。

    1．避免溶血，溶血样品可导致测定结果升高。

    2．应在2h内分离血清或血浆，室温下放置不超过8h，2~8℃不超过48h。急诊时应及时测定。

    3．肝素、草酸盐抗凝剂对测定结果有影响。

    淀粉酶(ase，AMY)

    EPS速率法：1．血清0~220U/L，尿液O～1OOOU/L

    1．血清(尿)AMY活性是诊断胰腺疾病的重要指标。急性胰腺炎时，血和尿中的AMY显著升高。急性胰腺炎发病后8～12h，血清AMY即开始升高，12~24h达高峰，2~5d恢复正常。如超过500U， 即有诊断意义，达350U应怀疑此病。尿AMY于急性胰腺炎发病后12~24h开始升高，下降也比血清AMY慢，所以在急性胰腺炎发病的后期测定尿AMY更有价值。

    2．急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔以及吗啡注射后等均可使AMY升高，但常低于500U。

    3．AMY降低见于肝病。

    1．口服避孕药、磺胺、噻嗪利尿药、甲基胆碱、可待因、吗啡、麻醉药、止痛药等可使测定结果偏高。

    2．草酸盐、枸橼酸盐及氟化钠等抗凝剂可抑制AMY活性，使测定结果偏低。肝素对AMY无抑制作用。

    3．唾液含高浓度淀粉酶，须防止带人。

    脂肪酶(Lipase，LPS)

    脂肪酶(LPS)又称三酰甘油酯酰水解酶或三酰甘油酶，是胰腺外分泌酶。血清中LPS主要来自胰腺，少量来自胃肠黏膜。

    色原底物法：13~63U/L。

    耦联酶法：1~54U/L。

    1．正常人血清LPS含量极少，但在急性胰腺炎时，2～12h血清LPS显著升高，24h至峰值，至48~72h可恢复正常，但随后又可持续升高8~15d。由于血清LPS在急性胰腺炎时活性升高的时间早，上升幅度大，持续时间长，故其诊断价值优于淀粉酶(AMY)，临床观察发现，凡血清AMY升高的病例，其LPS均升高；而LPS升高者AMY不一定升高，约有2/3AMY正常的胰腺炎患者，其LPS正常；非胰腺炎的急腹症有血清AMY升高，而LPS不升高。

    2．酗酒、酒精性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌、肝胆疾患等血清LPS可有不同程度的升高。

    1．测定标本可用血清或肝素抗凝血浆，但不能用EDTA抗凝的血浆，因对测试有干扰。

    2．抽血后4h内分离血清或血浆，20~25℃可稳定24h，4℃可稳定5d。

    3．胆红素可增加此酶活性，故黄疸标本可使测定结果偏高。

    4．血红蛋白可抑制脂肪酶活性，故溶血标本可使测定结果降低。

    酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)

    酸性磷酸酶(ACP)是作用类似ALP的磷酸酶（最适pH在7.0以下），存在于人体不同组织，如前列腺、红细胞、血小板、肾脏、肝脏、脾脏、胃、肌肉及骨髓等，主要存在于细胞的溶酶体中，以前列腺含量最多。正常男性血清中ACP有1/3—1/2来自前列腺，其余部分及女子血清中的ACP可能来自血小板、红细胞、白细胞及破骨细胞等。

    速率法：<11U/L。

    1．ACP测定主要用于诊断前列腺癌。前列腺癌时血清ACP活力显著升高，转移性患者升高更加显著。

    2．急性尿潴留、变形性骨炎、癌肿骨转移及甲亢时ACP可轻度升高。此外，慢性粒细胞性白血病时，ACP同工酶中的前列腺ACP(PAP)增高，而戈谢病、尼曼匹克病、网状内皮细胞白血病或毛细胞白血病均为非PAP增高。是否为抗酒石酸盐的非PAP增高为毛细胞性白血病的重要鉴别要点。

    1．防止标本溶血，因红细胞中含有大量ACP。

    2．因红细胞和血小板中富含ACP，应尽快分离血清。

    3．用血清及肝素抗凝的血浆测定结果相近，但血清中ACP稍高(因为血小板释放ACP)。 EDTA抗凝不干扰测定，而草酸盐有抑制作用。

    4．ACP定性差，温度高于37℃及pH>7.0时很快失活，因此高热患者不能准确测定ACP。

    单胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO)

    单胺氧化酶广泛分布于体内各组织器官，尤以肝、肾、小肠和胃含量最多，主要位于线粒体膜外面，并与膜紧密结合。MAO的生理功能因不同组织而异。

    醛苯腙法：健康人血清< 36U/ml。

    1．MAO活性升高可见于下列疾病：1肝硬化：MAO活性的高低能反映肝脏纤维化的程度，是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化患者血清MAO活性升高的阳性率可达80%以上。2各型肝炎：各型肝炎急性期患者的血清MAO活性多不升高，但急性重型肝炎时，因肝细胞坏死，线粒体释放大量MAO，可导致血清MAO活性升高。急性肝炎病程超过3m者，血清MAO活性亦升高，活动性慢性肝炎约半数患者血清MAO活性升高。3糖尿病可因合并脂肪肝、充血性心力衰竭，或因肝淤血而继发肝硬化时，血清MAO活性可升高。4甲亢可因纤维组织分解与合成旺盛、肢端肥大可因纤维组织过度合成等原因，而导致血清MAO活性不同程度升高。

    2．MAO活性降低可见于：服用避孕药、肾上腺皮质激素、左旋多巴肼类等药物引起。

    5’一核苷酸酶（5’-nucleotidase，5’-NT)

    连续监测法：2～17U/L。 60岁以上的老人均值约为青壮年的2倍。

    1.5’-NT主要用于肝胆疾病的临床诊断，5’-NT增高主要见于肝胆疾病，尤其是阻塞性黄疸，也可见于肝癌和肝炎，在多数情况下，5’-NT活性与ALP的活性一致，但在下列情况时，5’-NT与ALP活性不同。

    2．肝外胆道梗阻时，5’-NT活性一般与ALP相平行，但短期梗阻时，5’-NT活性一般不会增高，当较长的梗阻解除后，5’-NT活性的下降比AIP快。

    3．在胆汁淤积并发胆管炎、原发性和继发性胆汁性肝硬化和慢性肝炎时，5’-NT升高率高于ALP；肝肿瘤和肝肉芽肿时．5’-NT升高的敏感性高于ALP；酒精性肝硬化时，5'-NT 一般不升高；肝功能衰竭时，5’-NT正常。

    4.5’-NT正常ALP升高时，证明ALP多来源于骨组织或骨骼疾病，二者都升高时，证明有肝病存在，对无黄疸性肝病尤为重要。

    5．对诊断儿童和婴儿肝病，5’-NT比ALP敏感且具有特异性，因为5’-NT活性无生理性升高，而ALP在儿童和婴儿有生理性增高现象。

    6．诊断妊娠性肝内胆汁淤积5’-NT比ALP敏感，因为5’-NT无生理性增高。

    1．由于红细胞内含有大量的5’-NT，因此溶血会使测定结果升高。

    2．儿童可稍低于成人。

    3.5’-NT在室温中易失活并可增加氨的含量，故标本应置冰箱保存，4℃可保存4d，20℃可保存数月。

    胆碱蘸酶(acylcholine acylhydrolase，SCHE)

    胆碱酯酶是一类催化酰基胆碱水解的酶类。临床常规检查的胆碱酯酶(SCHE)，通常简称为CHE。

    速率法( 37℃)：5000～12000U/L。

    1．有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂中毒时，血清CHE活性明显降低，并与临床症状一致。

    2．由于CHE在肝脏合成后立即释放到血浆中，故是评价肝细胞合成功能的灵敏指标。各种肝病时，病情越差，血清CHE活性越低，持续降低无回升迹象者多预后不良。肝、胆疾病时血清ALT、GGT均升高，往往难以鉴别，如增加血清CHE测定，可发现CHE降低者均为肝脏疾患，而正常者多为胆管疾患。

    3．CHE:降低还可见于遗传性血清CHE异常症、饥饿、感染及贫血等。

    1．标本避免溶血。

    2．使用血清或肝素化的血浆较好。

    3．新生儿CHE活性约为健康成人50%，以后随年龄增长而升高。

    腺苷脱氨酶(adenosine deamianse，ADA)

    腺苷脱氨酶是催化腺嘌呤核苷产生次黄嘌呤核苷的氨基酸水解酶，主要催化腺苷和脱氧腺苷脱氨生成黄嘌呤苷和氨。ADA广泛分布于各种组织中，在盲肠、小肠黏膜和脾脏中含量最多。其在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值。

    速率法：15～20U/L。

    1．ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明显优于活检和细菌学方法。结核性胸、腹腔积液ADA活性显著增高，癌性胸、腹腔积液不增高，而血清ADA活性二者无显著性差异。此外， 脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。

    2．ADA活性升高，常见于肝炎、肝硬化、血色素沉着症、肿瘤引起的阻塞性黄疸、前列腺和膀胱癌、溶血性贫血、风湿热、伤寒、痛风、结核、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症。

    溶血标本禁用。

    α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase，AFU)

    α-L-岩藻糖苷酶是存在于血清中的一种溶酶体酸性水解酶，广泛分布于人体组织细胞、血液和体液中，参与体内糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢，是原发性肝癌的一种诊断标志物。

    速率法(37℃)：(27.1±12.8)U/L

    1．原发性肝癌患者血清AFU活力显著高于其他各类疾患（包括良恶性肿瘤）。

    2．血清AFU活性动态曲线对判断肝癌治疗效果、估计预后和预报复发有着极其重要的意义，甚至优于AFP。但是，值得提出的是，血清AFU活力测定在某些转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢或子宫癌之间有一些重叠，甚至在某些非肿瘤性疾患如肝硬化、慢性肝炎和消化道出血等也有轻度升高，在使用AFU时应与AFP同时测定，可提高原发性肝癌的诊断率，有较好的互补作用。原发性肝癌AFU增高者，手术切除后很快下降，一般在12w内恢复正常，若血清AFU下降后再度升高，提示病情复发。 3．AFU随妊娠周数的增加而增加，在自然分娩或人工终止妊娠后，迅速下降，5d后降至正常。

    1．标本避免溶血。

    2．及时分离血清，如不能及时测定，应置-20℃保存。

    超氧化物歧化酶(superoxide dismutase．SOD)

    超氧化物歧化酶广泛分布于生物体内，其生理作用为催化清除超氧阴离子自由基，它是由于氧化代谢过程中接受电子不足形成的，对机体有毒性。SOD可清除其毒性作用。SOD还与抗氧化、抗衰老、抗辐射有关，能保护细胞免受损伤。

    连续监测法(37℃)：555～633U/L。

    SOD增高常见于肿瘤、急性心肌梗死、高血压、精神分裂症等。

    1．标本肝素抗凝送检。

    2．做白细胞SOD测定时，标本不能溶血。

    β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(N-acety-β-glucosaminidase NAG)

    血清(21±6)U/L，尿液<16U/g肌酐

    1．尿NAG活性增高是肾小管损害的较灵敏的指标。增高见于急慢性肾炎、休克引起的肾衰竭(NAG特高)、肾病综合征、流行性出血热、中毒性肾病。肾病恢复期或肾实质病变不重时增高不明显。下泌尿系统或尿路结石时，NAG可正常。

    2．肾移植患者，尿NAG测定可早期发现排斥反应。一般在临床出现各种指征前1~3d既有尿NAG活性增高。

    3．肝硬化和慢性活动性肝炎晚期，肝组织有纤维化倾向者，血清NAG活性增高。中晚期妊娠，血清NAG活性也增高。

    血液凝固时血小板可释放出溶酶体酶，需用枸橼酸盐抗凝，尽快分离出血浆测定。